Журнал "Патогенез". 2016 #2


Агрегация модифицированных липопротеидов низкой плотности как фактор усиления атерогенности


Елизова Н.В.1, Карагодин В.П.2, Контуш А.3, Орехов А.Н.1

1 - ФГБНУ "Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии", Россия, 125315, Москва, ул. Балтийская, д. 8
2 - Российский экономический университет им. Г.В. Плеханова, 117997, Стремянный переулок, 36, Москва, Россия
3 - "Национальный институт здоровья и медицинских исследований", подразделение 1166; Университет Пьера и Марии Кюри, Университетский госпиталь Питье-Сальпетриер, 75651, Париж, Франция, Госпитальный бульвар, 83

Ключевые слова

липопротеиды, агрегация липопротеидов, атерогенность, атеросклероз

Аннотация

Цель исследования. Изучить влияние агрегации липопротеидов низкой плотности (ЛНП) на накопление внутриклеточного холестерина в макрофагах и оценить способность ЛНП к накоплению холестерина в зависимости от размеров частиц ЛНП. Методика. Для данного исследования получали ЛНП от здоровых лиц и лиц с сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССЗ). Фракцию ЛНП плотностью 1,019 - 1,065 г/мл получали путем ультрацентрифугирования сыворотки крови двухстадийным методом. В качестве модели для исследования влияния агрегации ЛНП использовали культуру моноцитов/макрофагов человека, которые выделяли из цельной крови методом магнитной сепарации CD14+ клеток при помощи набора для выделения моноцитов Miltenyi Biotech. Исследование захвата и деградации ЛНП макрофагами проводили с помощью 125I-меченных ЛНП. Содержание внутриклеточного холестерина измеряли путём экстракции липидов из клеток в смеси гексан-изопропанола (соотношение объемов 3:2). Концентрацию холестерина в образцах измеряли методом спектрофотометрии с помощью набора для общего определения холестерина (Fluitest CHOL, Analytican Biotechnologies AG). Результаты. Показано влияние агрегации ЛНП на накопление внутриклеточного холестерина макрофагами. Обнаружены достоверные различия в способности к агрегации ЛНП у здоровых лиц и лиц с ССЗ. Установлено, что нативные ЛНП не агрегировали до 6 часов инкубации, в то время как наблюдалось 3—3,5-кратное увеличение среднего размера частиц множественно-модифицированных ЛНП (ммЛНП) через 6 часов культивирования и 6,5—7-кратное увеличение частиц через 24 часа. Заключение. Циркулирующие множественно-модифицированные липопротеиды низкой плотности являются источником внутриклеточного холестерина в интиме сосудов. Способность ЛНП вызывать накопление внутриклеточного холестерина зависит от размера их частиц.

Полный текст статьи (pdf)
 
  125315, Москва, ул. Балтийская, дом 8    Телефон: +7 [499] 151-17-56    Факс: +7 [495] 601-23-66     E-mail: