Лаборатория функциональной ангиопротеомики и метаболомики


Заведующий лабораторией - д.х.н., профессор Лузянин Борис Петрович
тел. (499) 151-83-30

Лаборатория функциональной ангиопротеомики и метаболомики была создана в мае 2012 года на основе лаборатории аналитической биохимии, которая в свою очередь была организована в июле 2010 года. Первым направлением исследований этой лаборатории было изучение системы низкомолекулярных аминотиолов в патологии сердечно-сосудистых заболеваний. Аминотиолы использовались в качестве биомаркеров для оценки различных дисфункций человека и степени их развития. Непосредственный интерес представляет количественное определение в крови и плазме, прежде всего, гомоцистеина и его фракций. Первоначальной задачей стояло создание аналитической базы для анализа фракций аминотиолов и их метаболитов в биологическом материале (плазма крови, клеточные культуры и др.). Под руководством проф. Лузянина было опробировано несколько методов с использованием жидкостной хроматографии, капиллярного электрофореза и масс-спектрометрии. В настоящее время в лаборатории активно используется метод ВЭЖХ-УФ для определения общего содержания и восстановленной фракции основных тиолов плазмы (гомоцистеина, цистеина, глутатиона).

В нашей лаборатории совместно с лаб. регуляции агрегатного состояния крови проводятся работы по изучению редокс-статуса аминотиолов плазмы при ишемии головного мозга. Было показано, что он претерпевает резкие изменения в условиях локальной ишемии. Планируется дальнейшее изучение природы этого эффекта и его диагностической значимости.

Также в лаборатории ведется работа по созданию новых методов анализа S-аденозилгомоцистеина и S-аденозилметионина – перспективных маркеров эндотелиальной дисфункции. Так был оптимизирован ранее созданный подход для их определения на базе капиллярного электрофореза, позволивший проводить анализ не только в тканевых экстрактах, но также и в крови. В перспективе - разработка аналогичного метода для их определения в моче.

В соответствии с Госзаданием на 2015 год и плановый период 2016 и 2017 годов вторым направлением исследований стали поиск, верификация и валидация протеомных маркеров ишемического повреждения мозга. Оптимистичный взгляд на успешное решение этой сложной проблемы обусловлен использованием лабораторией многодисциплинарного подхода к решению следующих основных задач:
- изучение данных о белок-белковых взаимодействиях при построении гипотез об ассоциации новых потенциальных маркеров сердечно-сосудистых заболеваний;
- синтез протеотипичных пептидов потенциальных маркеров методами комбинаторной химии с использованием подхода Меррифилда;
- разработка способа определения пептидов потенциальных маркеров в биологических жидкостях методом мониторинга выбранных реакций, с использованием разработанного лабораторией способа ионизации («Wrong-way-round»-ионизация) гидрофобных пептидов электрораспылением;
- верификация потенциальных маркеров с использованием экспериментальных моделей;
- валидация и апробация потенциальных маркеров с использованием клинического материала.

«Узким горлышком» вышеупомянутого подхода стала разработка эффективного способа ионизации, позволяющего детектировать трудно определяемые пептиды. В настоящее время эта задача успешно решена и лаборатория приступает к следующему этапу исследований.

Для реализации поставленных задач в лаборатории применяется нижеследующее оборудование:
• Хроматограф ВЭЖХ Prekin Elmer 200 Series;
• Хроматограф УВЭЖХ Waters Acquity H-Class UPLC;
• Хроматограф УВЭЖХ Agilent 1200 Series;
• Капиллярныый электровофорез Agilent CE;
• Установка 2-х мерного электрофореза;
• Масс-спектрометр ионная ловушка Agilent LC/MSD TpapVL;
• Масс-спектрометр времяпролетный Waters Xevo G2Tof;
• Масс-спектрометр тройной квадрупольный Agilent 6490 Triple Quad LC/MS;

 
  125315, Москва, ул. Балтийская, дом 8    Телефон: +7 [499] 151-17-56    Факс: +7 [495] 601-23-66     E-mail: